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电泳缓冲液、染料和凝胶配置 - 尊龙凯时生物医疗解决方案

发布时间:2025-03-28   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在生物医学研究中,电泳缓冲液是进行分子分析的重要工具。本篇将介绍两种常用的电泳缓冲液:50×Tris-乙酸(TAE)和5×Tris-硼酸(TBE)的配制方法,以及相关染料和凝胶上样液的配方。这些配方的准确性对于研究结果的可靠性至关重要。

电泳缓冲液、染料和凝胶配置 - 尊龙凯时生物医疗解决方案

50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

要配置1L的50×Tris-乙酸缓冲液,请按照以下成分配制:

  • 2mol/L Tris碱:242g
  • 1mol/L 乙酸:571ml的冰乙酸(174mol/L)
  • 100mmol/L EDTA:200ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 纯化水:补足至1L

5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

配置1L的5×Tris-硼酸缓冲液需要以下成分:

  • 445mmol/L Tris碱:54g
  • 445mmol/L 硼酸盐:275g
  • 10mmol/L EDTA:20ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 纯化水:补足至1L

染料配方

在实验中,常用的染料如下:

1% 溴酚蓝(Bromophenol Blue)

将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100ml水中,搅拌至完全溶解。

1% 二甲/苯青FF(Xylene Cyanole FF)

溶解1g二甲/苯青FF于适量水中并定容至100ml。

10mg/ml 的溴化乙锭(Ethidium Bromide)

小心称取1g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100ml水并用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。用铝箔包裹装液管,并在4℃下储存。

凝胶上样液

凝胶上样液的不同配方用于不同实验条件:

6×碱性凝胶上样液

配置10ml溶液的各成分用量如下:

  • 0.3N氢氧化钠:6mmol/L
  • 18%聚蔗糖(400型):6g
  • 0.15%溴甲/酚绿
  • 0.25%二甲/苯青FF
  • 10N氢氧化钠:120μl
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):18g

6×聚蔗糖凝胶上样液

配置10ml溶液的各成分用量如下:

  • 0.15%溴酚蓝
  • 0.15%二甲/苯青FF
  • 5mmol/L EDTA
  • 15%聚蔗糖(400型):15ml
  • 1%溴酚蓝:15ml
  • 1%二甲/苯青FF:100μl
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):15g

6×甘油凝胶上样液

配置10ml溶液的各成分用量如下:

  • 0.15%溴酚蓝
  • 0.15%二甲/苯青FF
  • 5mmol/L EDTA
  • 50%甘油:15ml
  • 1%溴酚蓝:15ml
  • 1%二甲/苯青FF:100μl
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):3ml

这些缓冲液和上样液的准确制备对于分子生物学实验的顺利进行至关重要。为了保证实验品质,选择**尊龙凯时**作为实验室耗材的提供商是非常明智的选择,它们经验丰富,确保产品的优质和可靠。